子宫是产生月经和孕育胎儿的器官，位于骨盆腔中央，在膀胱与直肠之间。子宫内膜即粘膜，由上皮（属单层柱状上皮，有分泌细胞和纤毛细胞二种）和（由结缔组织构成，其内有大量的星形细胞，称为基质细胞）固有膜组成。

　　子宫内膜是指构成哺乳类子宫内壁的一层。子宫内膜对动情素和孕激素都起反应，因此可随着性周期（发情周期、月经周期）发生显著的变化。子宫内膜覆盖着粘膜，由粘膜上皮与其下方的固有层所组成。粘膜上皮为柱状上皮、立方上皮或复层柱状上皮，动情素分泌时，各上皮细胞将长大、分裂使数目增多。

　　该细胞通过慢病毒转染的方式携带SV40基因。

　　一、细胞简介：

　　细胞名称：人子宫内膜上皮细胞永生化
　　平台编号:zl-055946

　　二、细胞特性

　　1)细胞来源于人正常子宫组织。

　　2)细胞鉴定：细胞角蛋白（PCK）免疫荧光染色为阳性。

　　3)经鉴定细胞纯度高于90%。

　　4)不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。

　　5)细胞生长方式：上皮样，多角形细胞，贴壁培养。

　　三、产品的运输和保存

　　视天气状况和运输距离远近，公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。

　　1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中，置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输；收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养，如无法立刻进行复苏操作，冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。

　　2)T-25培养瓶充满完全培养基后进行常温运输；收到细胞后请镜下观察细胞生长状态，如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作，如悬浮的细胞较多，请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。

　　四、产品使用

　　1)本产品仅能用于科研

　　2)本产品未通过直接用于活体动物和人的审核

　　3)本产品未通过用于活体诊断的审核

　　五、细胞的培养步骤
　　1、细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
　　（1）弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
　　（2）加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
　　（3）按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
　　（4）将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
　　2、细胞复苏：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。
　　3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。
　　下面T25瓶为例；
　　1、细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶，细胞变圆脱落后，加入2ml完全培养基终止消化，可使用血球计数板计数。
　　2、1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮，加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中，注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。
　　3、将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。

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