人胃癌细胞

人胃癌细胞

人胃癌细胞

  • 平台编号: zl-057130
  • 细胞信息: MKN-1
  • 产品规格: 1×10⁶cells/T25培养瓶
  • 注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用(产品信息以出库为准)

  细胞介绍

  该细胞系由SAkiyama建立,源于一位35岁患有印戒细胞癌的女性的胃淋巴结。

  细胞特性

  1)来源:胃癌

  2)形态:上皮细胞样,贴壁生长

  3)含量:>1x10^6

  4)污染:支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性

  5)规格:T25瓶或者1mL冻存管包装

  运输和保存

  可选择干冰运输及发送复苏存活细胞方式:

  (1)干冰运输,收到后立即转入液氮或者-80度冰箱冻存或直接复苏;

  (2)存活细胞,收到后应继续生长,传代达到细胞生长状态良好时,再进行冻存。具体操作见细胞培养步骤。

  (3)收到细胞后请拍照,3天内如果发现污染,请及时拍照与我们联系。

  细胞接受后的处理:

  1)收到细胞后,请检查是否漏液,如果漏液,请拍照片发给我们。

  2)请先在显微镜下确认细胞生长状态,去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。

  3)弃去T25瓶中的培养基,添加6ml本公司附带的完全培养基。

  4)如果细胞长满(90%以上)请及时进行细胞传代,传代培养用6ml本公司附带的完全培养基。

  5)接到细胞次日,请检查细胞是否污染,若发现污染或疑似污染,请及时与我们取得联系。

  细胞用途:仅供科研使用。

  细胞培养操作规程,供参考

  一.培养基及培养冻存条件准备:

  1)准备RPMI-1640培养基;优质胎牛血清,10%;双抗,1%。

  2)培养条件:气相:空气,95%;二氧化碳,5%。温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。

  3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。

  二.细胞处理:

  1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。

  2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。

  对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:

  1.弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

  2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加入3ml此细胞的培养基终止消化。

  3.轻轻吹打后吸出,移入15ml离心管中,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养液后吹匀。

  4.移入到事先准备好的含有5ml培养基的T-25培养瓶中或含有14ml培养基的T-75培养瓶中培养。

  注:第一次传代推荐传代比例为1:2,以后传代比例可根据客户需要自己决定。

  3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。

  下面T25瓶为例:

  1,细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗一遍后加入1ml胰酶,细胞变圆脱落后,加入1ml含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。

  2,4min1000rpm离心去掉上清。加1ml血清重悬细胞,根据细胞数量加入血清和DMSO,轻轻混匀,DMSO终浓度为10%,细胞密度不低于1x10E6/ml,每支冻存管冻存1ml细胞悬液,注意冻存管做好标识。

  3,将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。

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