一、菌种简介

　　菌种名称：灰葡萄孢

　　平台编号:zl-077290

　　拉丁属名:Botrytis cinerea

　　其他编号：ATCC 58025

　　培养基编号：14

　　培养温度：27℃

　　用途：用于生产脱落酸。

　　分离源：草莓

　　二、培养基

　　综合马铃薯培养基（PDA）

　　20%马铃薯汁1L葡萄糖20g MgSO4.7H2O 1.5g KH2PO4 3g

　　Vitanib B1(硫胺素)Trace微量约8mg Agar(琼脂)20g pH自然

　　20%马铃薯汁配制方法：马铃薯洗净去皮，取200克切成小块,加水1000毫升煮沸20分

　　钟后滤去马铃薯块，将滤液补足1000ml。

　　三、保藏条件

　　安瓿冻干和培养物菌种应在2-8°C保存。西林瓶请置于-20°C保存，甘油管请置于-80°保存;请勿长期置于室温。

　　四、注意事项

　　1）冻干粉首次活化，干粉要全部用完，不能预留，用无菌吸管吸取0.3ml的培养液（即以上建议的培养基配方，不加琼脂）或者无菌水，滴入冻干管中，轻轻振荡至其溶解。吸取

　　全部菌悬液，接种在培养基上（建议不超过2支平板或者斜面，若接种液体培养基，则试管液体不超过5ml为宜）；

　　2）经过冷冻干燥保藏，菌种处于休眠状态，复苏培养时可能会延迟生长，这时需较长的培养时间；若您收到的是已复苏的培养物（非冻干菌），则可以直接用于您的实验，或根据

　　需要转接培养如有不明白之处，请务必先咨询我单位技术人员，避免不必要的损失；

　　3）微生物菌种应保藏于低温、清洁干燥的地方，室温放置时间过长会导致菌种衰退；

　　4）菌种操作应在无菌条件下进行；转种完毕，应经灭菌再做丢弃处理；

　　5）应根据菌种状况及时转接，冻干菌种保藏时间通常为2-25年；

　　6）菌种使用过程中如出现杂菌污染或菌种生产性能下降，应及时和质粒载体网联系。

　　7）如若有菌种复苏不活或者污染等情况，请在收到后2个月内联系，逾期不予受理；

　　8）打管操作需由专业微生物技术人员在相应的防护设备中进行，生物危害程度为三类的菌种应在生物安全柜中操作，打管时冻干管应远离面部，保护眼睛。

　　9）安瓿瓶开封：用浸过75％酒精的脱脂棉擦净安瓿管，用火焰加热其顶端，滴少量（2-3滴）无菌水至加热顶端使之破裂，用锉刀或者镊子敲下已破裂的安瓿管顶端并将冻干管开口

　　处在火焰上过一遍，并保持在火焰旁操作。

　　10）甘油管使用：使用本甘油菌时可以不用完全融解，在甘油菌表面蘸取少量涂板或进行液体培养即可。也可以完全融解后使用，但随着冻融次数的增加，细菌的活力会逐渐下降。

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