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SNU216 人胃癌细胞详情及运输方式

SNU216 人胃癌细胞详情及运输方式
2022-11-16
  人胃癌细胞

  平台编号:zl-057127

  规格:1×10⁶cells/T25培养瓶

  细胞信息:SNU216

  种属

  人源细胞系/食管、胃、肠、肝、胆

  价格

  询价

  到货周期

  10-15个工作日

  详情描述

  细胞特性

  1)来源:胃癌

  2)形态:上皮细胞样,贴壁生长

  3)含量:>1x10e6个/mL

  4)污染:支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性

  5)规格:T25瓶或者1mL冻存管包装

  运输和保存:使用含有优质胎牛血清的2ml冻存管发送存活细胞。收到细胞后,可在1000RPM,常温条件下,离心5min后,于洁净操作台弃去上清,加入推荐使用的培养基后转移至10cm培养皿或者T25培养瓶中培养,传代达到细胞生长状态良好时,再进行冻存。具体操作见细胞培养步骤。

  细胞用途:仅供科研使用。

  细胞培养步骤

  一.培养基及培养冻存条件准备:

  1)准备RPMI-1640培养基(添加NaHCO3 1.5g/L,D-葡萄糖2.5g/L,丙酮酸钠0.11g/L),90%;优质胎牛血清,10%。

  2)培养条件:气相:空气,95%;二氧化碳,5%。温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。

  3)冻存液:90%完全培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。

  二.细胞处理:

  1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。

  2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。

  对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:

  1.弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

  2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。

  3.按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。

  4.将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

  3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。

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